银杏双*酮可通过诱导铁死亡促进顺铂对肺癌

银杏双*酮可通过诱导铁死亡促进顺铂对肺癌细胞的抑制作用

铁死亡（Ferroptosis）是年由BrentR.Stockwell提出的一种铁依赖性的，区别于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型的细胞程序性死亡方式。有相关研究表明，从银杏叶分离得到的银杏双*酮可以触发自噬，并且自噬可以触发铁死亡。因此，本篇文献为治疗肺癌，将银杏双*酮与肺癌化疗药物顺铂联合使用，考察两者是否可以通过铁死亡的机制来产生协同治疗作用。

首先，作者将不同浓度的银杏双*酮与不同浓度的顺铂联合处理肺癌细胞A、NCI-H、SPC-A-1，来测定抑制率，并通过CI值的计算来得到 协同效果的药物浓度。同时作者也构建了剂量响应曲面。结果显示，当选用银杏双*酮5μM，顺铂5μM时，具有 的协同效果。

接下来，作者在联合用药的细胞中加入了坏死、凋亡、自噬抑制剂，发现并没有逆转细胞的抑制率。于是作者推测是否发生了铁死亡。由于铁死亡的核心机制是铁的积聚以及脂质 化，因此作者考察了细胞内脂质 化和游离铁的水平，发现应用银杏双*酮后，两者水平上升，且联合用药后上升更加明显。同时，SLC7A11和GPX4是诱导铁死亡的主要靶点，作者考察了它们的mRNA、蛋白水平，结果发现联合用药后mRNA水平没有明显的变化，但是蛋白水平明显下降，这也就是说，这两个蛋白发生了降解。同时，作者也考察了铁转运相关蛋白，SLC40A1和转铁蛋白，结果显示，联合用药后SLC40A1下调，转铁蛋白上调，这就导致了细胞内游离铁的升高。接下来，作者考察了由于SLC7A11的抑制，转运受到影响的胱氨酸和谷氨酸。结果表明，联合用药后，逆转了顺铂诱导的胱氨酸上升，和谷氨酸下降。同时作者也考察了GSH/GSSG的比值，联合用药后比值下降，这也就说明了细胞内氧化水平的升高。

下面，由于Nrf2/HO-1通路可以中和氧化应激来下调铁死亡，因此作者考察Nrf2、HO-1蛋白的表达情况，发现联合用药后，两个蛋白被明显下调。另外，作者也考察了Nrf2与抗氧化原件ARE的结合情况，发现联合用药后，可以抵消顺铂诱导的ARE介导的转录。同时，通过ChIP实验，发现，联合用药可以降低Nrf2与HO-1启动子的结合。作者也发现，顺铂诱导的HO-1mRNA水平升高也被银杏双*酮所逆转。以上结果就可以说明银杏双*酮可以逆转顺铂诱导的Nrf2/HO-1轴的激活。

作者在接下来的实验中，引入了铁死亡抑制剂UAMC，再次考察铁死亡相关的指标，结果显示，脂质 化、游离铁、SLC7A11/GPX4均的水平被其逆转。同时Nrf2/HO-1轴的失活也被UAMC所减轻。

另外，作者也发现，联合用药后，也可导致活性氧的增加、线粒体膜电位的丢失，进一步激活了caspase9，再激活caspase3和7， 导致细胞的凋亡。并且加入铁死亡的抑制剂后，可以逆转联合用药诱导的凋亡以及膜电位的丧失。这也就说明了铁死亡可能促进了银杏双*酮和顺铂联合作用所诱导的凋亡。

，作者也构建了裸鼠异位肿瘤模型，可以发现顺铂组体重降低明显，但是与银杏双*酮联合试用后，体重有所上升，这也说明了银杏双*酮可减轻顺铂的*性。同时，也显示联合用药组，肿瘤体积最小，但是与UAMC联合试用后，肿瘤缩小的作用被逆转。

本文思路

总结

本文工作量较大，涉及了三个不同的肺癌细胞系，以及联合用药。并且图表较为清晰美观，作图方式也比较丰富。讨论部分也较为详细，分析了一些结果，并给出了对应的推测，为将来更深入的研究提供了方向。但是，如果 可以将铁死亡和凋亡的关系更清晰地证明，并且更深入地探讨可能会使文章更加完整。

指导教师：姚国栋

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